目的要求

      了解测定果蔬组织中抗坏血酸含量的意义,学习利用碘酸钾滴定法测定抗坏血酸含量的原理和方法。

基本原理

      当碘酸钾溶液滴人到含有碘化钾-淀粉指示剂的酸性试液中时,能释放出游离态的碘。释放出的游离碘可使淀粉指示剂呈蓝色。其反应如下:

KI03 + 5KI + 6HCI → 6KCI + 3H2O +3I2

      当酸性试液中含有抗坏血酸时,可将释放的游离态碘还原生成碘酸,不会使溶液呈现蓝色。同时抗坏血酸被氧化成脱氢抗坏血酸,失去还原能力。继续滴加碘酸钾溶液,直至抗坏血酸完全被氧化后,滴加的碘酸钾溶液释放出的游离碘不能再被还原,这时就可使淀粉指示剂呈蓝色,即为终点。根据碘酸钾溶液的滴定消耗量,可计算出溶液中抗坏血酸的含量。

材料、仪器及试剂

(一)材料

      鲜枣、青椒、山楂、苹果、柑橘、芒果等。

(二)仪器及用具

      研钵、三角瓶( 100mL)、容量瓶( 1 000mL、100mL)、移液器、滴定管、漏斗、滤纸、电子天平、铁架台、漏斗架。

(三)试剂

1、2%(体积分数)盐酸溶液
量取2.0mL浓盐酸(分析纯),加入到90mL蒸馏水中,再稀释至100mL。

2、10g/L 碘化钾溶液
称取1. 0g KI,用蒸馏水溶解、稀释至100mL。

3、5g/L 淀粉溶液
称取0.5g可溶性淀粉,用少量蒸馏水调成浆状后,再加入80mL蒸馏水,煮沸至透明状,冷却后稀释至100mL。

4、1mmol/L KIO3溶液
称取356.8mgKI03(预先在105℃烘2h后,在干燥器中冷却备用),用蒸馏水溶解,定容至1 000mL。

实验步骤

(一)提取

      称取10.0g果蔬样品置于研钵中,加入少量2%盐酸溶液,在冰浴条件下研磨成浆状,转入到100mL容量瓶中,用2%盐酸溶液冲洗研钵后,亦倒入量瓶中。再用2%盐酸溶液定容到刻度,混合,提取10min后过滤,取滤液备用。

(二)滴定

      分别取0.5mL10g/LKI溶液、2.0mL5g/L淀粉溶液、5.0mL提取液和2.5mL蒸馏水置于三角瓶中,混匀。用KI03溶液逐滴滴人进行滴定。滴定时,不断摇动三角瓶,至微蓝色不褪为终点(30s内不褪色为止)。记录所用KI03溶液的体积( mL),重复三次。同时,以5.0mL2%盐酸溶液作为空白按同样方法进行滴定。

实验结果与计算

1.测定数据记录

抗坏血酸含量的测定

2.计算结果

根据KIO3滴定液的消耗量,计算果蔬中抗坏血酸含量,以100g样品(鲜重)中含有的抗坏血酸的质量表示,即mg/100g。计算公式:

抗坏血酸含量测定

式中 V——样品滴定消耗的KIO3溶液的体积,mL;
Vo——空白滴定消耗的KIO3溶液的体积,mL;
0.088——1mL lmmol/L KI0;溶液相当的抗坏血酸的质量,mg;
VS——滴定时所取样品溶液体积,mL;
V——样品提取液总体积, mL;
m——样品质量,g。

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