1、报告中包含那些数据?

      我们最终会给您提供一份PDF版本报告及可编辑的Excel格式数据。报告中包含实验原理与设计,试剂耗材,实验仪器,实验步骤,实验结果等内容,包含标曲图及检测样品的总离子流图。数据包含原始检测浓度及激素含量。如果对质谱图有需求,可联系我司客服人员单独获取。


2、液质联用检测方法用的是什么设备,灵敏度如何?

      卡文思检测采用高效液相色谱+串联质谱法(即液质联用)。检测仪器为Agilent 1290高效液相色谱仪与AB SCIEX Qtrap 6500+质谱仪串联。是目前较为灵敏的液质联用系统。可以精确、高效的检测植物样品中的内源激素含量。一般激素线性可达到pg级别。

      HPLC-MS/MS,依托二级质谱,可以得到更多结构信息,减少假阳性结果,同时将液相色谱高效的在线分离能力与质谱的高选择性、高灵敏度的检测能力相结合,弥补了传统液相检测器的不足,可以同时得到化合物的保留时间、分子量及特征结构碎片等丰富的信息,是复杂样品和微量/痕量样品分离分析最有力的研究手段。


3、内标法和外标法有什么区别,哪一个更准确?

      ①外标法:用待测组分的纯品作对照物质,以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法。

      ②内标法:在样品处理前,将一定量与待测组分在结构性质相近的待测物质(通常为同位素标记的同类别物质)加入样品及标准品中,根据内标在样品基质及标品中的响应值之比来校正待测物含量。

      ③内标法与外标法的选择
      内标法和外标法都是定量分析实验方法,内标法是在外标的基础上,在每个标样及样品中加入终浓度相等的内标物质,以此内标物质作为参比,来对实验过程及仪器检测上可能存在的误差进行校正。
      应用外标法能够满足要求,首选还是外标法,毕竟简单而省事。对于精密度要求比较高、结果准确度会产生重大影响、实验室条件不是很理想的等等条件下,用内标法还是必要的。无论应用哪种方法,方法的验证和确认都是很重要的,只要是按照程序经过验证和确认的方法,都有其应用的空间的。


内标法与外标法的选择
选择角度内标法外标法
准确性高
精密度高
程序简单
损失率低
成本低
微量分析

4、实验过程中会带标样么?

      卡文思检测每次实验都会独立做标准曲线,有标样,实验结果中也会体现检测参数的标准曲线,线性方程,相关系数、精密度和灵敏度相关结果。


5、我没有测过激素,应该如何选择检测的指标?

      主要根据您的研究方向而定,如研究抗逆相关就检测SA、JA等激素;研究种子萌发相关的可以测定GA3、ABA;研究植物生长状态的可以测定IAA、ABA、TZR、GA3、BRs等。

      以下列举一些激素生理作用,供您参考:

生长素 植物生长;植物向性;植物顶端优势;维管系统分化;根的分化;植物组织培养;开花;源库关系的调节;果实生长;老化
赤霉素 种子成长、休眠及萌发;节间伸长的促进作用;开花;雄花发育的促进作用;结果、果实生长及成熟
细胞分裂素 促进细胞分裂和扩大;诱导芽分化;解除顶端优势;促进种子休眠及芽萌发;延缓叶片老化;诱导营养物质运输;促进结实;促进花芽分化;促进叶片气孔张开
乙烯 解除休眠;调节茎伸长生长;促进根生长及分化;促进器官脱落;诱导开花;影响雌花发育;促进花老化;促进果实成熟;伤害反应
脱落酸 休眠;生长;气孔开度;根系的吸水与溢泌;蛋白合成;器官分化;果实的完熟;植物的抗逆性
独脚金内酯 在植物株型建成中发挥重要作用,抑制植物侧芽的伸长进而抑制分枝的产生
油菜素内酯 对分蘖有一定的促进效果
褪黑素 提高了植物抗氧化酶活性,从而保持活性氧的平衡,提高植物的抗逆性植物株型形成

6、检测样品需要多少样品量?

      样品量需要根据您检测指标及取样部位而定,比如:吲哚乙酸(IAA),广泛存在于各类物种及部位中,一般新鲜植物样品0.5-1g即可满足检测需求,种子样品需要0.3-0.5g,而对于细胞分裂素、赤霉素等一部分在植物体内含量较低的内源激素,一般需要新鲜样品1-2g,种子样品0.5-1g方可满足检测要求。

7、我要测好几种激素,样品量该怎么提供?

      如果您需要检测的是常见内源激素且可以一起出峰的,只需提供一份样品。例如:您需要测IAA、ABA、SA、JA、GA3五种激素。由于GA3样品需求量多一些,所以按GA3所需样品量提供,具体样品提供量可参考下表:

8、哪些指标可以一起测,哪些指标需要单独测?

      ⑴ 可一起检测指标如下:

      ①常规激素指标

吲哚乙酸(IAA) 水杨酸(SA)
吲哚丁酸(IBA) 水杨酸甲酯(MESA)
脱落酸(ABA) 茉莉酸(JA)
玉米素(Zeatin) 二氢茉莉酸(H2JA)
反式玉米素(trans-Z) 茉莉酸-异亮氨酸(JA-ILE)
反式玉米素核苷(trans-ZR) 茉莉酸甲酯(MEJA)
异戊烯基腺嘌呤(IP) 12-氧植物二烯酸(12-OPDA)
异戊烯基腺苷(IPA) 赤霉素(GA1 、GA3 、GA4、 GA7)

      ②赤霉素指标

赤霉素 GA1、GA3 、GA4、GA5、GA6、 GA7 、GA8、 GA9、 GA13、 GA14、 GA15、 GA19、 GA20、 GA24 、GA29 、GA44、 GA51、 GA53

      ⑵ 需单独检测的指标:

1-氨基-环丙烷羧酸(ACC) 1-氨基-环丙烷羧酸合成酶(ACC合成酶)
油菜素内酯(2,4-BL) 独脚金内酯(5-DS)
褪黑素(MT) 磺肽素(PSK)

9、一般讨论植物体中赤霉素含量,是指哪一种呢?

      不同客户研究样品中的赤霉素种类可能不太一样,检测较为热门的有GA1 、GA3 、GA4、 GA7。其中研究最多的是GA3,也最容易检出。GA1、GA4和GA7在植物不同生长周期中体现不同,也有相关的研究文献报道。

10、你们能测乙烯吗?

      能够检测的,采用气质联用的方式进行检测,机器型号为是安捷伦7890B+顶空7697A+质谱5977B MSD

11、我想测的激素不在列表内,如果委托公司来检测,是怎样的流程?

      首先需要您确认需要测哪种激素,如果有相关文献可以提供给我们,技术确认,综合评估后,如果设备条件满足,可以新建方法。费用按照建方法费用外加标准品费用收取。

12、我想自己提供方法检测,公司会做预实验先摸索一下吗?

      可以先安排做预实验,再决定后续实验设计。一般采用2-3个样进行预实验,根据不同样品和检测项目, 收取相应费用。

13、为什么市面上油菜素内酯和独脚金内酯费用比其他激素指标价格高?

      这两类属于新的植物激素,被称为第六大类激素。一方面使用进口标准品,价格昂贵,货期较长。另外,这两类实验操作跟普通常见内源激素也不一样,前处理步骤较为繁琐,涉及Waters固相萃取和多项纯化步骤,所用到的试剂耗材也多,综合来讲,成本高出很多,所以费用较高。

14、什么是生物学重复和技术重复?

      ①生物学重复可以校正样品在内源激素提取过程中产生的各种误差,减少样品内部存在的基质干扰和提取损失,使检测结果更加真实,客观。

      ②技术重复可以减少样品在检测过程中产生的杂质干扰,通过连续进样提高检测的精密度和准确性,但无法排除样品提取过程中可能产生的损失和基质干扰。

15、有在你们单位检测后发表过的文章吗?

      有的。http://www.convinced-test.com/plant-hormone.html

      我们非常鼓励客户在文章中注明检测数据来自卡文思检测,您的文章发表后可联系我们一起分享您的喜悦,我们也会郑重对您表示感谢!

16、卡文思检测如何确保检测数据的可靠性

      ①标准的SOP操作规程

      ②仪器的高精度和高稳定性

      ③实验室的严格质量控制过程(准确度、精密度、灵敏度)

      ④报告的审查审核制度(三级审核)

17、检测周期大概多久?

      根据目前订单排队情况,从收到样品起,正常周期为7个工作日。如果遇到旺季订单排队,需以合同签订为准。如需加急,按加急程度,收取部分加急费用。

18、植物样品如何取样?如何邮寄?

      为了确保个体的特殊性引起的误差,我们建议“多株多点取样原则”,务必取新鲜植物样品,用纯净水冲洗材料,取下后迅速放入液氮中速冻。而后放入冻存管或用锡箔纸包起来并标记编号,干冰运输。由于植物对损伤的应激响应会影响植物激素含量,为了得到准确并符合预期的结果,尽量减少植物样品在常温下的暴露时间,创造超低温环境延缓内源激素降解。

19、如何才能享受优惠?

      我们的价格根据市场参考价制定,不存在虚报价格的情况。但是也存在优惠的情况:第一,您要检测的样品量较大,前处理会节省人工和时间成本,我们会为您的订单提供优惠。第二,公司会不定期做促销活动,您可以关注我们的官网,知晓最新优惠内容。http://www.convinced-test.com/index.html

20、植物内源激素的检测难点

      ①激素在植物体内含量低,检测灵敏度要求高;

      ②激素类物质对光、温度等环境因素较敏感;

      ③植物组织基质效应(matrix effects)比较复杂。

21、植物内源性激素的检测原理

      ①提取:采用异丙醇/水/盐酸溶液的方法,通过提取液加酸提高激素在有机溶剂中溶解性并钝化组织中的部分酶。而后通过二氯甲烷萃取并以氮气吹扫方式浓缩样品,该方法流程相对简单,待测物损失较小,同时由于Qtrap6500仪器的灵敏性,不需过多繁琐的净化步骤即可准确检测大部分痕量待测物。

      ②色谱、质谱分析

      高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,而式样中的不同组分由于与柱结合的能力不同,从而先后从柱内流出、进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。

      质谱是一种测量离子质荷比(质量-电荷比)的分析方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。液相-质谱联用技术需要液相流出物经离子源离子化并去除溶剂后进入质谱。

      本实验使用AB公司Qtrap6500质谱仪,此质谱仪的质量分析器为三重四级杆-离子肼模式。采用ESI-HPLC-MS/MS方法对植物激素进行定量分析。以安捷伦1290高效液相色谱仪分离样品物质,以电喷雾电离(ESI)为离子源,经多通道检测(MRM)模式扫描。即同时进行多个SIM(选择离子监测)模式扫描。该模式常用于对目标化合物检测,灵敏度高,但缺乏进一步的物质结构信息。

      其原理是质量分析器(Q1)特异性选择母离子(parent ion)后,在碰撞反应室(Q2)将母离子通过碰撞诱导解离(collision-induceddissociation, CID)使这一离子裂解生成子离子(daughter ions),在Q3选择子离子,并对其信号进行检测。对于大多数激素我们都会检测2到3个子离子,并取其中一个(通常为响应值较高的)作为定量离子。其余子离子作为定性离子(通常选择质核比较大的)。以目标物质在样品及标准品中的出峰时间,以及目标物质各子离子之前的比值在样品及标准品中的比值确定样品中的待测物。并通过线性回归方程拟合对待测物定量。